掃描電子顯微鏡（SEM）在生物樣品研究中廣泛應(yīng)用，但為了在SEM中觀察生物樣品，需要對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)闹苽?。以下是從冷凍切片到金屬涂覆的一般步驟，以便將生物樣品制備成SEM觀察所需的樣品：

固定樣品： 首先，生物樣品需要進(jìn)行固定以保持其結(jié)構(gòu)和形態(tài)。常用的固定方法包括使用蛋白質(zhì)交聯(lián)劑（如戊二醛）或化學(xué)固定劑。

冷凍切片： 將固定的生物樣品切割成薄片，通常采用超薄切片技術(shù)。這可以通過冷凍切片機(jī)將樣品冷凍并切成非常薄的切片，以保留其內(nèi)部結(jié)構(gòu)。

脫水： 從冷凍切片中去除水分，常用的方法是將樣品在低溫下暴露在低壓下，以使水分逐漸升華，而不是通過液體蒸發(fā)。

金屬涂覆： 生物樣品通常不導(dǎo)電，而SEM需要樣品表面具有導(dǎo)電性。因此，在觀察之前，需要在樣品表面涂覆一層薄金屬層，通常使用金屬蒸發(fā)或?yàn)R射技術(shù)。

金屬蒸發(fā)： 在真空條件下，將金屬（如金或鉑）加熱至其熔點(diǎn)，使其蒸發(fā)并沉積在樣品表面，形成一層薄金屬涂層。

金屬濺射： 使用離子束或電子束將金屬靶材濺射到樣品表面，也能產(chǎn)生薄金屬層。

觀察： 經(jīng)過金屬涂覆后，生物樣品已準(zhǔn)備好在SEM中進(jìn)行觀察。通過在SEM中照射樣品表面，收集反射電子或二次電子來生成顯微圖像。

這些步驟是一般的生物樣品制備過程，但需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行微調(diào)和優(yōu)化。制備的關(guān)鍵是保持樣品的結(jié)構(gòu)、形態(tài)和細(xì)節(jié)，同時(shí)確保樣品表面具有適當(dāng)?shù)膶?dǎo)電性。在每個(gè)步驟中，控制實(shí)驗(yàn)條件和儀器參數(shù)非常重要，以獲得高質(zhì)量的SEM圖像。

ZEM18臺(tái)式掃描電鏡

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